Moendo osso no freezer / moinho

Qualquer planta ou tecido animal pode ser triturado em um freezer / moinho SPEX, e isso inclui todos os ossos: frescos ou envelhecidos, úmidos ou secos. Frascos de moagem de congelador / moinho são imersos em nitrogênio líquido (LN) antes e durante a moagem, primeiro para tornar a amostra frágil o suficiente para moer e, em seguida, mantê-la quebradiça durante a moagem real. A retificação real é feita por um impactor de aço em forma de haste que é movido magneticamente para frente e para trás entre dois plugues de extremidade de aço.

O sucesso na crio-moagem Freezer / Mill depende de duas coisas principais:

A amostra deve estar fria o suficiente para ser quebradiça.
O impactador deve ser capaz de se mover livremente para frente e para trás.

A quantidade de amostra por carga e o tamanho dos pedaços de amostra podem afetar fortemente a eficiência de moagem do moinho, especialmente com osso, que pode ser muito resistente. Um teste simples é carregar o frasco e, em seguida, sacudi-lo para frente e para trás para garantir que o impactador possa se mover de uma ponta a outra do frasco. Se os pedaços de amostra forem muito grandes ou houver muita amostra no frasco, o impactador pode emperrar ou não se mover o suficiente para triturar com eficácia. Em casos extremos, se o impactador for desviado lateralmente ou preso contra o cilindro de policarbonato por um grande pedaço de osso, o cilindro pode rachar ou quebrar.

Para moer osso no frasco padrão 6751, recomendamos cortá-lo antes de moer em pedaços de aproximadamente 5 mm de diâmetro ou menores. A quantidade a ser triturada em um Frasco 6751 pode variar de menos de meio grama a quatro ou cinco gramas, dependendo da tenacidade da amostra e do tamanho das peças. O tamanho ideal da amostra e a quantidade para suas amostras devem ser determinados empiricamente. Pode ser possível triturar um ou dois pedaços grandes de osso de cada vez – por exemplo, um pedaço de 2 gramas em uma extremidade do frasco – mas a uniformidade dos resultados será melhor e haverá muito menos risco de rachaduras um cilindro se o osso for cortado em pedaços menores primeiro.

Para osso no frasco 6751, recomendamos pelo menos 10 minutos de tempo de pré-resfriamento. Dependendo da quantidade e do tamanho dos pedaços de osso, a retificação pode levar de 1 a 10 minutos. Tempos de moagem superiores a 2 minutos devem ser divididos em períodos de moagem de 2 minutos separados por 2 minutos de resfriamento. Os tempos de moagem podem ser reduzidos aumentando-se a taxa de moagem do ajuste de fábrica de 10 para 14 ou 15. Se os cilindros centrais de policarbonato 6751C persistirem em rachaduras ou quebra, recomendamos o uso dos conjuntos de frascos de aço 6781S.

O grande frasco 6801 pode triturar até 40 ou 50 gramas de osso e o tamanho das peças não é importante, a menos que sejam grandes o suficiente para evitar que o impactador se mova. No entanto, o frasco 6801 geralmente leva mais tempo para moer uma amostra do que o frasco 6751 e, para uma amostra grande, recomendamos 15 minutos de pré-resfriamento. Tal como acontece com o frasco 6751, a trituração deve ser programada para dois minutos e dois minutos de resfriamento por quantos ciclos forem necessários para triturar o osso até a faixa de tamanho de partícula desejada. A taxa de trituração pode ser deixada na configuração de fábrica de 10 ou aumentada até que o impactador comece a “gaguejar”; a taxa efetiva máxima para o frasco 6801 funcionar sem problemas é geralmente 12.

O desempenho da moagem no freezer / moinho é afetado pela quantidade da amostra, pelo tamanho das peças da amostra e pelo tempo de moagem. Para melhorar o desempenho, diminua a quantidade geral da amostra, pré-corte a amostra em pedaços menores e mais uniformes ou moa para ciclos adicionais. 10 minutos de pré-resfriamento para o frasco 6751 e 15 minutos de pré-resfriamento para o frasco 6801 devem ser suficientes para o osso, mas para pedaços muito grandes de osso no 6801 você pode precisar aumentar o tempo de pré-resfriamento para 20 minutos.

Novamente, recomendamos operar o Freezer / Moinho por 2 minutos por ciclo de moagem com 2 minutos de resfriamento entre os ciclos, para permitir que a amostra e a serpentina esfriem de volta. É possível operar o Freezer / Mill continuamente, mas à medida que a bobina aquece, ele se torna menos eficiente. O osso provavelmente permanecerá “triturável” por muitos minutos de moagem contínua, mas para amostras difíceis de moer, como fibras sintéticas e folhas de polímero, é provavelmente melhor mantê-los o mais frio possível durante a moagem.

De um modo geral, todos os componentes dos frascos do Freezer / Mill podem ser limpos com água quente e detergente ou sabão e descontaminados por imersão em uma solução de lixívia a 10% ou ácidos minerais diluídos. Após a limpeza, devem ser secados. Os cilindros de policarbonato podem ser danificados por calor excessivo (como na autoclavagem) ou exposição a solventes orgânicos, incluindo álcool. Impactadores de aço e plugues finais e cilindros de aço podem ser esterilizados por desinfetantes, álcool, autoclavagem, etc., mas não devem ser deixados em contato com água e fluidos aquosos por qualquer período de tempo, pois o aço magnético pode enferrujar sob essas condições.